貨號:ipsMed-iCell-CA003
儲存條件:2 ~ 8 ℃
產品簡介
iPS細胞消化液可以應用于非飼養層依賴的iPS傳代,該工作液屬于非酶類溫和消化液,對細胞損傷小且消化時間適中便于操作,是一種已被普遍使用的消化液,可與iPS培養基搭配使用。
操作說明
1、消化前,準備 37 ℃預熱好的無鈣鎂PBS 溶液及消化液,完全培養基。
2、吸走上清,并加入37℃預熱好的PBS 溶液清洗1次。
3、加入適量(按 6 孔板每孔加 1mL,6cm 皿加 2mL,10cm 皿加 3mL 的量)的 37℃預熱好的消化液。
4、37℃放置1-2min,用手指輕彈皿/板/瓶身,顯微鏡下觀察到大部分克隆邊緣開始脫離培養皿/板底,克隆內部大部分細胞成團脫落。
5、加入適量的完全培養基終止消化。
6、移入離心管,300g離心5min。
7、吸出培養基,確保細胞團完整。
8、然后緩慢加入1mL完全培養基,用手指輕彈離心管底部,使細胞團脫離底部并分散。
9、傳代比例為 1:6—1:8,根據最終培養細胞的液體體積,加入ROCK inhibitor Y27632,終濃度為10μM。
10、將培養皿/板/瓶置于37℃培養箱中,每天更換培養基(換液不需要再添加Y27632,但培養基需提前預熱)。
注:
1.吹吸的力度要輕柔,吹打脫落和吹吸混勻的次數總共不超過10次為宜。吹打過度導致大量單細胞出現是造成細胞分化或死亡的重要原因。
2.若有少量細胞無法從皿底脫落,屬于正常現象,需延長消化時間。
僅限科研用。
培養體系中的一些組分是對人體健康有害的物質,請不要用暴露的皮膚接觸培養體系的液體和有培養體系的液體殘留的容器內部;這部分有害物質的濃度和危害性都較低,如有接觸,立即用自來水沖洗即可。
你可能感興趣
評價 (0)
留言板