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產品信息

產品描述

支原體污染是細胞培養領域的世界性問題，世界各國的細胞支原體污染平均比例為30~60%。支原體直徑約為 0.1~0.3μm，具有變形能力，可透過常見過濾膜（0.22~0.45μm），因此常規的無菌過濾方法不能將其去除，常用的抗生素也對支原體無效。

支原體可通過細胞之間交叉污染，操作人員的口腔、皮膚造成污染、血清等添加物而帶入污染。由于支原體無法通過常規的光學顯微鏡觀察到，不會引起培養基混濁，因此細胞被支原體污染一般難以察覺。

支原體會消耗必須氨基酸，影響細胞生長速率，造成代謝物累積，改變細胞形態，影響DNA、RNA、蛋白質的合成，抑制細胞因子表達，改變被污染細胞的基因表達譜，誘導染色體畸變。

iCell支原體高效清除劑經過了上百種細胞的測試和長期的實驗驗證，能以較低的濃度殺滅支原體，適合支原體久殺不凈、污染耐藥支原體、污染多種類支原體、污染特殊類型支原體、支原體反復復發的細胞。本產品僅12小時就可以顯著抑制支原體生長，1~2周左右即可清除支原體污染，且不影響細胞本身的代謝，完美兼具特異性和高效清除支原體的特點，特別適合細胞株/系中頑固和特殊類型支原體的清除，最大程度上挽救您的珍貴細胞。

使用方法

從4～8℃冰箱內取出支原體高效清除劑，將試劑管瞬時離心（3000rpm，3~5s）后放置于EP管架上，用75%的酒精噴灑試劑管的表面，在生物安全柜中進行無菌操作；

以T25細胞培養瓶為例

清除支原體污染操作規程

對于支原體污染較輕或細胞較為脆弱的，如胚胎干細胞（H1、H9、iPS），建議采用2000×濃度清除支原體，如：6mL的完全培養基加入3μL的支原體高效清除劑混勻。

若支原體污染較嚴重，可酌情增加藥物濃度以提高清除支原體的效率，推薦采用1000×濃度清除支原體，如：6mL的完全培養基加入6μL的支原體高效清除劑混勻。

連續加藥培養1~2周（或傳代3次）后，檢測是否還存在支原體污染。如果還存在支原體污染，可繼續培養1周。

注意：

① 貼壁細胞換液或傳代前，棄去舊的培養基，用PBS輕輕沖洗細胞表面2次。

② 若細胞達到可傳代比例，請及時傳代并鋪入新的細胞培養瓶，換新瓶的過程也可有效規避培養瓶壁上殘留支原體的污染；

③ PCR檢測支原體清除干凈后，必須進行傳代并鋪入新的細胞培養瓶，且在新瓶中加藥維持1~2天后，才可以撤掉支原體高效清除劑避免在舊瓶中撤藥后舊瓶壁上的支原體殘留造成二次污染；

預防支原體污染操作規程

若細胞需長時間培養或存在共用液氮罐的情況，建議每2~3周進行定期預防。在細胞培養基中加入適量支原體高效清除劑，通常推薦使用的稀釋倍數為3000×，如：6mL的完全培養基加入2μL的支原體高效清除劑混勻。連續加藥培養1~2周，即可有效防止支原體污染或抑制支原體增殖。

注意：由于胚胎干細胞（H1、H9、iPS）較為脆弱，建議采用5000×濃度預防支原體。

質量控制

R 通過支原體、真菌、支原體、內毒素檢測。

R 通過滲透壓、pH 檢測。

R 通過產品性能檢測。

運輸與保存方法

冰袋運輸；

4～8℃ 避光保存，保質期2年；

產品優勢

ê高效性，12h即可有效抑制支原體的增殖；

ê高特異性，特異性清除支原體；

ê無耐藥性，活性成分為多肽類，不會產生耐藥性；

ê高利用率，未被利用的成分可降解為氨基酸被細胞利用；

ê高安全性，對細胞幾乎無毒性，已在上百種細胞上驗證。

實驗流程圖