貨號(hào)：iCell-MK01-002
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號(hào) | 規(guī) 格 | 儲(chǔ)存條件 |
Mycoplasma Efficient Removal Agent，1000 × 支原體高效清除試劑，1000 × | iCell-MK01-002 J | 500 μL | 避光 4 ～8℃ |
iCell-MK01-002 I | 1 mL | ||
iCell-MK01-002H | 2 mL |
產(chǎn)品描述
支原體污染是細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的世界性問(wèn)題，世界各國(guó)的細(xì)胞支原體污染平均比例為30~60%。支原體直徑約為 0.1~0.3μm，具有變形能力，可透過(guò)常見過(guò)濾膜（0.22~0.45μm），因此常規(guī)的無(wú)菌過(guò)濾方法不能將其去除，常用的抗生素也對(duì)支原體無(wú)效。
支原體可通過(guò)細(xì)胞之間交叉污染，操作人員的口腔、皮膚造成污染、血清等添加物而帶入污染。由于支原體無(wú)法通過(guò)常規(guī)的光學(xué)顯微鏡觀察到，不會(huì)引起培養(yǎng)基混濁，因此細(xì)胞被支原體污染一般難以察覺(jué)。
支原體會(huì)消耗必須氨基酸，影響細(xì)胞生長(zhǎng)速率，造成代謝物累積，改變細(xì)胞形態(tài)，影響DNA、RNA、蛋白質(zhì)的合成，抑制細(xì)胞因子表達(dá)，改變被污染細(xì)胞的基因表達(dá)譜，誘導(dǎo)染色體畸變。
iCell支原體高效清除劑經(jīng)過(guò)了上百種細(xì)胞的測(cè)試和長(zhǎng)期的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，能以較低的濃度殺滅支原體，適合支原體久殺不凈、污染耐藥支原體、污染多種類支原體、污染特殊類型支原體、支原體反復(fù)復(fù)發(fā)的細(xì)胞。本產(chǎn)品僅12小時(shí)就可以顯著抑制支原體生長(zhǎng)，1~2周左右即可清除支原體污染，且不影響細(xì)胞本身的代謝，完美兼具特異性和高效清除支原體的特點(diǎn)，特別適合細(xì)胞株/系中頑固和特殊類型支原體的清除，最大程度上挽救您的珍貴細(xì)胞。
使用方法
從4～8℃冰箱內(nèi)取出支原體高效清除劑，將試劑管瞬時(shí)離心（3000rpm，3~5s）后放置于EP管架上，用75%的酒精噴灑試劑管的表面，在生物安全柜中進(jìn)行無(wú)菌操作；
以T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶為例
清除支原體污染操作規(guī)程
對(duì)于支原體污染較輕或細(xì)胞較為脆弱的，如胚胎干細(xì)胞（H1、H9、iPS），建議采用2000×濃度清除支原體，如：6mL的完全培養(yǎng)基加入3μL的支原體高效清除劑混勻。
若支原體污染較嚴(yán)重，可酌情增加藥物濃度以提高清除支原體的效率，推薦采用1000×濃度清除支原體，如：6mL的完全培養(yǎng)基加入6μL的支原體高效清除劑混勻。
連續(xù)加藥培養(yǎng)1~2周（或傳代3次）后，檢測(cè)是否還存在支原體污染。如果還存在支原體污染，可繼續(xù)培養(yǎng)1周。
注意：
① 貼壁細(xì)胞換液或傳代前，棄去舊的培養(yǎng)基，用PBS輕輕沖洗細(xì)胞表面2次。
② 若細(xì)胞達(dá)到可傳代比例，請(qǐng)及時(shí)傳代并鋪入新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，換新瓶的過(guò)程也可有效規(guī)避培養(yǎng)瓶壁上殘留支原體的污染；
③ PCR檢測(cè)支原體清除干凈后，必須進(jìn)行傳代并鋪入新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，且在新瓶中加藥維持1~2天后，才可以撤掉支原體高效清除劑避免在舊瓶中撤藥后舊瓶壁上的支原體殘留造成二次污染；
預(yù)防支原體污染操作規(guī)程
若細(xì)胞需長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)或存在共用液氮罐的情況，建議每2~3周進(jìn)行定期預(yù)防。在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量支原體高效清除劑，通常推薦使用的稀釋倍數(shù)為3000×，如：6mL的完全培養(yǎng)基加入2μL的支原體高效清除劑混勻。連續(xù)加藥培養(yǎng)1~2周，即可有效防止支原體污染或抑制支原體增殖。
注意：由于胚胎干細(xì)胞（H1、H9、iPS）較為脆弱，建議采用5000×濃度預(yù)防支原體。
質(zhì)量控制
R 通過(guò)支原體、真菌、支原體、內(nèi)毒素檢測(cè)。
R 通過(guò)滲透壓、pH 檢測(cè)。
R 通過(guò)產(chǎn)品性能檢測(cè)。
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸；
4～8℃ 避光保存，保質(zhì)期2年；
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
ê高效性，12h即可有效抑制支原體的增殖；
ê高特異性，特異性清除支原體；
ê無(wú)耐藥性，活性成分為多肽類，不會(huì)產(chǎn)生耐藥性；
ê高利用率，未被利用的成分可降解為氨基酸被細(xì)胞利用；
ê高安全性，對(duì)細(xì)胞幾乎無(wú)毒性，已在上百種細(xì)胞上驗(yàn)證。
實(shí)驗(yàn)流程圖
① 使用本試劑前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書；
② 本產(chǎn)品經(jīng)0.1μm 過(guò)濾除菌，使用本產(chǎn)品時(shí)無(wú)需過(guò)濾，可直接加入培養(yǎng)基使用；
③ 為了發(fā)揮最好的藥效，含藥培養(yǎng)基建議現(xiàn)配現(xiàn)用，如果加藥培養(yǎng)基未用完，于4℃冰箱中避光保存，2周內(nèi)用完，使用培養(yǎng)基前需預(yù)熱至37℃；
④ 如遇個(gè)別細(xì)胞對(duì)本試劑敏感，細(xì)胞生長(zhǎng)速度明顯受影響時(shí)，建議減量使用或進(jìn)行稀釋度測(cè)試；
⑤ 支原體高效清除劑處理后，會(huì)有很好的預(yù)防和清除效果，但是如果環(huán)境、耗材、試劑中仍有污染源存在，細(xì)胞可能會(huì)再次污染，因此需做好適當(dāng)?shù)念A(yù)防措施；
⑥ 在添加了本試劑的細(xì)胞培養(yǎng)基中培養(yǎng)1~2周后，推薦使用支原體PCR檢測(cè)試劑盒（貨號(hào): iCell-MD01-001）判斷是否還存在支原體污染。
⑦ 加入本產(chǎn)品進(jìn)行支原體預(yù)防和清除時(shí)，無(wú)需添加雙抗（青霉素-鏈霉素）；
⑧ 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作；
⑨ 本產(chǎn)品僅供研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用，不得用于診斷或治療。
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